Page 437 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 19
AL LABORATOARELOR SYNEVO ANALIZĂ CROMOZOMIALĂ

Leucemia mieloidă cronică
În CML este necesar să se efectueze cel puţin două culturi celulare: una de 24 ore şi celalaltă de
48 ore. Dacă există suficientă probă va fi efectuată şi o cultură de 72 ore, alături de o cultură de 24
ore suplimentară. În momentul diagnosticului examenul citogenetic se poate efectua atât din măduva
osoasă cât şi din sângele periferic; după obţinerea remisiunii hematologice analiza măduvei este
obligatorie pentru evaluarea răspunsului citogenetic. Înainte de recoltarea celulelor se recomandă o
expunere de 0.5-2 ore (opţional 24 ore) la Colcemid.
Tehnica FISH cu sonde pentru BCR şi ABL1 este obligatorie în cazurile în care numărul de metafaze
este insuficient sau în situaţia în care la citogenetica convenţională nu se depistează t(9;22)(q34;q11)
– în ~ 5% din cazuri fuziunea BCR-ABL1 este criptică .
3
CML se caracterizează prin prezenţa translocaţiei cromozomiale t(9;22)(q34;q11) care a fost
considerată iniţial ca o anomalie 22 q- (un cromozom 22 cu braţul lung scurtat) şi denumită cromozomul
Philadelphia (Ph) (Nowell, 1960; Rowley, 1973). Această translocaţie are drept rezultat juxtapunerea
genei tirozin kinazei ABL1 (Abelson) de pe cromozomul 9 lângă gena BCR (Breakpoint Cluster
Region) de pe cromozomul 22 cu formarea genei de fuziune BCR-ABL1 (fuziune cap-coadă capăt 5’
BCR – capăt 3’ ABL). Gena anormală se transcrie într-un ARNm hibrid ce va determina în final sinteza
unei proteine himerice Bcr-Abl cu activitate tirozin-kinazică autonomă.
În mod obişnuit punctele de ruptură de pe gena BCR se situează în regiunea majoră (M-bcr) care
se întinde pe aproximativ 6 kb, între exonii 12 şi 16; în urma fuzionării cu secvenţe 3’ ale genei ABL
va rezulta o genă hibrid ce va genera în final o proteină de 210 kD. Punctele de ruptură mai pot
fi localizate şi într-o regiune minoră (m-bcr); în acest caz va rezulta în final o proteină de fuziune
trunchiată de 190 kDa, care conţine doar secvenţele codificate de primii 2 exoni ai genei BCR (vezi
fig.19.3.1). Proteina p210 este întâlnită în principal în CML, în timp ce p190 în ALL Ph+ .
10

437