Page 63 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 1

3;5
Clasificarea mediilor de cultură - poate fi în funcŃie de:

• medii uzuale, care permit creşterea unui număr mare de specii bacteriene;
Tolerabilitate • medii speciale, care permit creşterea unei game restrânse de specii, uneori chiar Ńintit pentru
o singură specie.
• medii de îmbogăŃire (întotdeauna lichide) pentru anumite grupe de bacterii;
• medii de izolare: uzuale, nediferenŃiale, diferenŃiale, care diferenŃiază printr-un singur
Scopul utilizării
caracter grupe taxonomice sau tulpini;
• medii selective, care inhibă unele grupe bacteriene favorizând multiplicarea altora.
• medii test - convenŃionale sau microtest;
Identificare
• medii multitest - asociate sau combinate.

Pentru fiecare categorie de prelevate patologice se utilizează uzual un mediu sau un set de medii care permit izolarea
bacteriilor cel mai frecvent implicate în infecŃiile zonei respective. Acest set de medii uzuale poate fi suplimentat cu alte
medii în raport cu datele clinico-epidemiologice . Pentru izolarea germenilor patogeni din produse pluricontaminate,
1
este obligatorie însămânŃarea pe medii diferenŃiale.
În cazul în care se apreciază că prelevatul conŃine un număr redus de germeni, se vor folosi medii lichide de
îmbogăŃire (bulion BHI pentru germeni aerobi, bulion thioglycolat cu resazurină pentru anaerobi, bulion selenit pentru
coprocultură etc) 1;3;5 .
Incubarea mediilor însămânŃate se face Ńinând cont de exigenŃele bacteriilor suspectate:
• bacteriile aerobe se cultivă în atmosfera obisnuită;
• bacteriile carboxifile necesită incubarea în atmosferă de CO2, aceasta realizându-se în exicator cu ajutorul unei
lumânări;
• bacteriile strict anaerobe sunt cultivate cu ajutorul sistemelor Gaspak.
Majoritatea bacteriilor de interes medical cresc adecvat la 37ºC, spre deosebire de fungi a căror creştere este optimă
la 30ºC.
Urmărirea plăcilor incubate se face 24 - 48 de ore pentru bacteriile obişnuite; 2-5 zile pentru fungi.
Examinarea culturilor
Aspectul culturii este dependent de specie şi de compoziŃia mediului. În mediu lichid creşterea poate fi: uniformă, cu
depozit, granule, peliculă, inel, degajare gaz, formare de pigment
5.
Pe mediile solide bacteriile formează colonii, caracterul acestora (formă, mărime, suprafaŃă, opacitate, consistenŃă,
miros) şi cantitatea în care s-au dezvoltat (+,++,+++,++++) orientând microbiologul către diagnostic.
Un aspect important îl reprezintă absenŃa creşterii bacteriene în cazul produselor de obicei pluricontaminate (ex.
exsudat nazofaringian, coprocultură, secreŃie vaginală). Acest lucru sugerează faptul că pacientul se află sub tratament
cu antibiotic sistemic sau local (ovule, antiseptice orofaringiene).
SemnificaŃia clinică a unor izolate poate fi stabilită încă din primocultură, în cazul izolatelor din prelevate necontaminate
4
(lichide de puncŃie) sau bacilii Gram-negativi izolaŃi dincolo de un anumit prag în urocultura cantitativă .
În cazul culturilor monobacteriene izolate din prelevate normal sterile (hemocultură, lichide de puncŃie) se trece direct
la identificare şi antibiogramă. Din culturile pluribacteriene sunt repicate colonii, apoi sunt identificate până la nivel de
specie şi este testată sensibilitatea la antibiotice.
SelecŃionarea acestora se face în funcŃie de aspectul coloniei, natura prelevatului, diagnosticul clinic şi rezultatele
1
examenului microscopic colorat .

Bibliografie

1. Betty A.Forbes, Daniel F.Sahm, Alice S.Weissfeld. Role of Microscopy in the Diagnosis of Infectious Diseases. Laboratory Cultivation and
Isolation of Bacteria. In Bailey and Scott's Diagnostic Microbiology. Mosby, USA, 11 ed. 2002, 119-147.
2. Dumitru Buiuc. Microscopia optică în studiul practic al microbilo. Cultivarea şi studiul caracterelor fiziologice ale bacteriilor. În Microbiologia
Practică -Un ghid în studiul şi practica medicinii. Institutul de Medicină şi Farmacie Iaşi, România, ed. 1972, 33-65.
3. Dumitru Buiuc. Microscopie. Izolarea bacteriilor şi studiul culturilor. În Tratat de Microbiologie Clinică. Dumitru Buiuc, Marian NeguŃ. Editura
Medicală, România,1 ed. 1999, 91-127.
4. Kimberle C.Chapin, Patrick R.Murray. Principles of Stains and Media. In Manual of Clinical Microbiology. Patrick R.Murray, Ellen JO Baron,
James H.Jorgensen, Michael A.Pfaller, Robert H.Yolken. ASM PRESS, USA, 8 ed. 2003, 257-261.
5. Olga-Mihaela DorobăŃ. Morfologia şi structura celulei bacteriene. Creşterea, supravieŃuirea şi moartea bacteriilor. În Bacteriologie Medicală.
Universitatea "Titu Maiorescu", România ed. 2006, 5-18, 22-35.