Page 113 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1
P. 113
GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE 5
AL LABORATOARELOR SYNEVO METODE DE LUCRU
9.0
8.0
7.0
normalizata 6.0
5.0
Fluorescenta 4.0
3.0
2.0 Titrul maxim
Titrul minim
1.0
0
-1.0 10 20 30 40 50
Nr. ciclurilor de amplificare
Fig. 5.6.1.4
Deoarece cantitatea de ADN VHB QS este constantă în toate probele, fluorescenţa emisă de sonda
de detecţie ar trebui să fie detectată în cursul aceluiaşi ciclu, în cazul tuturor probelor .
4
În treimea inferioară a regiunii de amplificare exponenţială se stabileşte o valoare prag (“assigned
fluorescence level”); traversarea acestei valori marchează declanşarea amplificării. Pentru fiecare
probă se poate determina cu exactitate ciclul de amplificare în care se înregistrează depăşirea valorii
prag (Ct = critical threshold value - vezi fig.5.6.1.5). Cu cât valoarea Ct este mai mare, cu atât titrul
ADN VHB este mai mic .
4;7
1.0
0.9
0.8
Nivelul prag de Ct = 27.1
0.7 fluorescenta
normalizata 0.6
0.5
0.4
Fluorescenta 0.3
0.2
0.1
0
-0.1
-0.2 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29
Nr. ciclurilor de amplificare
Fig. 5.6.1.5
Constantele de calibrare specifice lotului de reactivi vor fi folosite împreună cu Ct corespunzătoare
ADN VHB şi ADN VHB QS pentru calcularea titrului ADN VHB din probe şi controale .
4
113
