Page 238 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 1

7 TESTE DE HEMATOLOGIE GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

7.3.3 Test Coombs direct
Sinonime – test antiglobulinic direct.
Informaţii generale
Demonstrarea prezenţei de imunoglobuline sau a complementului pe suprafaţa hematiilor susţine
diagnosticul de distrucţie eritrocitară mediată imun .
6
Există două clase majore de anticorpi care reacţionează cu eritrocitele. Anticorpii compleţi sau salini
aglutinează eritrocitele suspendate în soluţie salină; aceştia sunt de obicei de tip IgM (cel mai bun
exemplu de aglutinare salină la temperatura camerei este cea utilizată în grupajul ABO). In vivo
anticorpii IgM fixează complementul şi produc hemoliza imediată intravasculară. Anticorpii care nu
reacţionează vizibil în mediu salin şi produc reacţii de aglutinare numai prin utilizarea de tehnici
speciale sunt numiţi aglutinine incomplete şi sunt de obicei de tip IgG (cel mai bun exemplu sunt
anticorpii anti-Rh, care, dacă sunt prezenţi în serul primitorului de sânge incompatibil, produc o reacţie
hemolitică transfuzională întârziată, extravasculară) . 3
Pentru a certifica faptul că hematiile unui pacient sunt învelite (sensibilizate) cu imunoglobuline,
complement sau ambele, se adaugă la o suspensie de eritrocite provenite de la pacient antiser
cu reactivitate faţă de moleculele de Ig şi/sau complement umane, care va determina aglutinarea
acestora. Iniţial testarea se face su antiseruri polispecifice, care conţin anti-IgG, anti-C3d şi ocazional
şi activitate anti-lanţ uşor. Reactivii monospecifici diferenţiază în continuare între IgG, C3d, existând
şi seruri monospecifice pentru C3b, C4b, C4d şi lanţul greu al IgG. Antiseruri specifice pentru IgM sau
IgA sunt rar utilizate, deoarece IgM nu mai sunt găsite de obicei încă ataşate pe suprafaţa celulară, iar
IgA sunt foarte rar întâlnite pe suprafaţa eritrocitelor .
6
Utilizând sânge recoltat pe EDTA sau pe citrat activarea in vitro a complementului de către autoanticorpii
la rece benigni este inhibată. Spălarea eritrocitelor îndepărtează globulinele solubile sau ataşate
nespecific, ceea ce permite detecţia imunoglobulinelor şi factorilor complementului specific legate de
eritrocite in vivo . 4
Recomandări pentru efectuarea testului Coombs direct
• investigarea reacţiilor transfuzionale acute sau întârziate (demonstrarea fixării pe suprafaţa
eritrocitelor de la donator a aloanticorpilor prezenţi în serul pacientului);
• suspiciune de hemoliză autoimună;
• boala hemolitică a nou-născutului;
• hemoliză imună indusă de medicamente;
• atunci când martorul auto efectuat în cadrul grupajului sanguin, screening-ului prezenţei de
aloanticorpi şi testelor de compatibilitate este pozitiv .
4
Pregătire pacient - nu este necesară o pregătire prealabilă .
5
Specimen recoltat - sânge venos .
5
Recipient de recoltare - vacutainer cu K3-EDTA .
5
Cantitate recoltată - cât permite vacuumul .
5
Cauze de respingere a probei - specimen coagulat .
5
Stabilitate probă - testul se efectuează imediat, dacă acest lucru nu este posibil, proba se
păstrează 48 ore la 2-8°C .
5
Prelucrare necesară după recoltare - o parte din eritrocite se spală de trei-patru ori cu soluţie
238