Page 100 - Ghidul Serviciilor Medicale Synevo, Ediția 2, Volum 3

18 TESTE DE BIOLOGIE MOLECULARĂ GHIDUL SERVICIILOR MEDICALE
AL LABORATOARELOR SYNEVO

genei α şi la capătul 3’ al genei α cu formarea unei gene de fuziune α α Ambele deleţii au ca rezultat
2 1.
2
1
reducerea cu 50% a sintezei lanţului α de pe cromozomul afectat .
1
În ceea ce priveşte α talasemia, sunt cunoscute mai mult de 20 de deleţii diferite, de la 6 kb la 300 kb,
0
ce conduc la înlăturarea ambelor gene de α-globină (uneori şi la deleţia genei zeta). Cele mai cunoscute
sunt - - SEA , - - , - - THAI , - - MED , - - 20.5 care în cazul homozigoţiei provoacă sindromul hemoglobinei Bart .
FIL
5
Atunci când oricare dintre aceste alele apare în combinaţie cu o altă alelă purtătoare a deleţiei unei
singure gene α (ca de exemplu, -α ) rezultă boala Hb H, caracterizată prin prezenţa tetramerului Hb
3.7
Bart la naştere, înlocuit ulterior de tetramerul Hb H .
2
Deleţia elementului reglator major care include intensificatorul HS-40 induce scăderea marcată sau
anularea expresiei ambelor gene α cu structură normală (α talasemie) .
0
1
Tehnica de secvenţiere este aplicată în cazurile în care nu a fost depistată nici o deleţie a lanţurilor
α-globinei în prezenţa suspiciunii clinice de alfa-talasemie. Pot fi detectate astfel mutaţiile
punctiforme: 7
● Mutaţiile codonului de terminalizare interferă cu fenomenul de translaţie a ARN-ului prin producerea
unui lanţ α instabil alungit. Cele mai cunoscute exemple sunt hemoglobina Constant Spring (întâlnită
în sudul Chinei, Tailanda, Cambodgia, Vietnam, Laos, bazinul mediteranean) şi hemoglobina Koya
Dora (India).
● Mutaţii care afectează clivajul, splicing-ul şi poliadenilarea ARN-ului. De exemplu IVSI-117(G→A)
la nivelul genei α este o mutaţie a joncţiunii de splicing întâlnită în India care conduce la o genă
1
nefuncţională.α TSaudi α, întâlnită în mod obişnuit în regiunea mediteraneană, este o mutaţie a semnalului

de poliadenilare care conduce la o reducere marcată a sintezei lanţului α .
1
● Mutaţii care determină instabilitatea posttranslaţională a unui lanţ αanormal, de exemplu hemoglobina

Quong Sze (α 125Leu→Pro α sau α α), întâlnită la evreii kurzi şi în Asia de Sud-Est, şi hemoglobina Agrinio
QS
(α 29Leu→Pro α sau α α), întâlnită în regiunea mediteraneană şi Asia de sud-Est . 1
Agr
În zona mediteraneană α+ talasemia (cauzată de deleţia -α ) este obişnuită, cu frecvenţa cea mai
3.7
mare în Sardinia şi cea mai scăzută în Spania. Pe de altă parte, α talasemia este foarte rară, ceea ce
0
explică şi incidenţa extrem de scăzută a hidropsului fetal. O caracteristică importantă a α- talasemiei
în populaţia mediteraneană este heterogenicitatea mutaţiilor, în special a celor nedeleţionale .
7
Recomandări pentru testarea genetică
- confirmarea diagnosticului la persoanele cu suspiciune clinică;
- depistarea statusului de purtător asimptomatic;
- diagnosticul prenatal .
7
Specimen recoltat - sânge venos .
5
Recipient de recoltare - vacutainer ce conţine EDTA ca anticoagulant 5 .
Cantitate recoltată - 5 mL sânge .
5
Cauze de respingere a probei - folosirea heparinei ca anticoagulant; probe coagulate sau
hemolizate .
5
Stabilitate probă – 7 zile la 2-8ºC .
5
Metodă – secvenţiere completă HbA şi HbA ; analiza duplicaţiilor/deleţiilor prin metoda MLPA .
5
2
1
Interpretarea rezultatelor
Alfa plus-talasemia
100